想知道液相色譜柱在選用前都需要了解些什么嗎？
更新時(shí)間：2019-09-24 點(diǎn)擊次數(shù)：1916次
液相色譜柱基于熔融核技術(shù)，性能超越傳統(tǒng)全孔5μm和3μm色譜柱，在不增加柱壓的情況下，實(shí)現(xiàn)快速分離，可作為傳統(tǒng)5μm色譜柱的新型標(biāo)準(zhǔn)柱。
1、可使用100%水系流動(dòng)相，柱內(nèi)不會(huì)出現(xiàn)坍塌現(xiàn)象；
2、適合于分離親水性化合物；
3、與常規(guī)ODS不同的選擇性，加強(qiáng)極性化合物的保留，適合于分離純化肽類(lèi)和生物分子；
4、酸性環(huán)境下比普通ODS柱具有更長(zhǎng)使用壽命。
在選擇液相色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì)，他們的類(lèi)型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。
1、樣品是極性的且弱酸性的；就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測(cè)，即要選擇承受100%純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱。
2、如果樣品極性太強(qiáng)，或酸性太強(qiáng)；可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC（親水色譜），也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱（缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)，另外離子對(duì)試劑很難洗下來(lái)，基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn)）
3、若樣品是堿性的；可選擇高純硅膠柱（高純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾）或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱（如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等），他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾，一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做，因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留。
4、如果堿性化合物的極性太強(qiáng)，或堿性太強(qiáng)；可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(cè)（優(yōu)點(diǎn)是方法開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單，缺點(diǎn)是目前實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少，價(jià)格也高）或者選用HILIC色譜柱（硅膠柱在反相條件下使用，這也是很經(jīng)典的檢測(cè)堿性樣品的方法）選擇強(qiáng)離子交換柱（缺點(diǎn)是不能用來(lái)分析其它樣品，對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)）也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。
